MISSION(S) L'agent mettra en œuvre des techniques de culture de cellules souches pluripotentes au sein d'un service commun de l'IGBMC. ACTIVITES PRINCIPALES Conduire des techniques de culture cellulaire dans le cadre de prestations d'un service commun pour 45 équipes de recherche Gérer les stocks de lignées de cellules souches embryonnaires murines (mESC) et de cellules souches pluripotentes induites humaines (hiPSC) - décongeler et mettre en culture - repiquer - congeler et produire des cellules en fonction des besoins des chercheurs Préparer des stocks congelés de fibroblastes embryonnaires murins (Mouse Embryonic Fibroblasts ; MEF) : commande d'embryons - dissection - mise en culture - préparation des stocks congelés Préparer des stocks congelés de MEF inactivés à la mitomycine et les décongeler en fonction des besoins des chercheurs Préparer des stocks de LIF (Leukemia Inhibitory Factor) - réaliser les tests de contrôle qualité en vue de la validation des lots produits Réaliser le caryotype des lignées cellulaires Préparer des boîtes « coatées » pour la culture d'hiPSC Participer à la caractérisation de cellules souches pluripotentes induites humaines (hiPSC) : - Réalisation d'extraction d'ARN - Réalisation de réaction de transcription réverse Participer à l'édition génétique de cellules souches pluripotentes induites humaines (hiPSC) : - Sélection des clones et entretien (changement de milieu, amplification, congélation) Appliquer une technique de biologie moléculaire (PCR) pour la détection des mycoplasmes dans les cultures cellulaires dans le cadre d'une démarche qualité Adapter les conditions expérimentales dans le cadre de nouveaux projets concernant des cellules souches murines et humaines - rédiger les nouveaux protocoles Adapter des cellules à des conditions définies Réaliser des tests d'optimisation des conditions de culture, des tests de matériel, de milieux de culture, de sérum - consigner et mettre en forme les résultats Préparer des milieux de culture et des solutions spécifiques à la culture de cellules Appliquer les réglementations liées aux activités expérimentales en matière d'hygiène et de sécurité Assurer la gestion des stocks et des commandes des consommables Assurer Ie suivi de la maintenance de premier niveau de I'équipement